试剂:
1.考马斯亮蓝试剂;
2.标准蛋白质溶液。
蛋白质含量的测定步骤:
1.配制Bradford浓染液;
2.标准曲线蛋白质样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品,例如测定抗体,可用纯化的抗体作为标准,也可用抗体作为标准蛋白;
3.将待测样本溶于缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同;
4.按1比5的比例用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去;
5.每个样本加5毫升稀释的染料结合溶液,染液与蛋白质结合后,将由红色变为蓝色,在595纳米波长下测定其吸光度;
6.根据标准曲线计算待测样本的浓度。