流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。
气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。
流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。
在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭。
溶解气体还可能引起某些样品的氧化或使溶液pH值发生变化。
流动相脱气的方法液相色谱流动相脱气使用较多的方法大概有四种:氦气脱气、真空脱气、超声波脱气、加热脱气。
液相柱子进空气有三种解决办法,具体方法如下:
1.用纯甲醇,或者纯乙腈,小流速0.2ml每min到0.4ml每min冲洗过夜;
2.如果有铁架台,让色谱柱大头朝上,就是流动相由下方流入,由上方流出,然后再接入废液,一般气泡比较轻,容易往上面走;
3.也可以考虑用异丙醇冲洗,不过异丙醇对色谱柱的填料可能会有一定的伤害,所以需要慎重。
液相色谱与质谱联用注意事项如下:
1.液相色谱与质谱联用最关键的是液相色谱的流速要和质谱离子源的进样流速匹配,不同离子源用适用的离子化硫量是不一样的。
2.色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是用于分离植物色素,其方法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素的石油醚倒入管中。
此时,玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。
然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素,并可分别进行鉴定。
色谱法也由此而得名。
3.色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。
与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
4.质谱是一种与光谱并列的谱学方法,通常意义上是指广泛应用于各个学科领域中通过制备、分离、检测气相离子来鉴定化合物的一种专门技术。
质谱法在一次分析中可提供丰富的结构信息,将分离技术与质谱法相结合是分离科学方法中的一项突破性进展。
在众多的分析测试方法中,质谱学方法被认为是一种同时具备高特异性和高灵敏度且得到了广泛应用的普适性方法。
质谱仪器一般由样品导入系统、离子源、质量分析器、检测器、数据处理系统等部分组成。
5.质谱分析是一种测量离子荷质比的分析方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。
在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。