在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制性内切酶和DNA连接酶。
基因表达载体的构建,即目的基因与运载体结合,是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。
其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
基因表达载体的过程:
1.用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。
2.用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端,部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果。
3.将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处,遵守碱基互补配对原则,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键。
4.加入适量DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来,形成一个重组DNA分子。
例如:人的胰岛素基因通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合,形成重组DNA分子。
具体解释如下:
1.终止密码子启动子、标记基因和目的基因都是表达载体的组成部分。
而终止密码子是目的基因的一部分,该选项是被包含的关系。
2.首先作为载体使用的质粒是进行过人工修饰的,并非是自然条件的质粒直接使用,修饰过程就是添加标记基因、酶切位点的过程。
3.启动子与终止子应该是质粒上的,分别位于编码区分上游与下游。
基因身份证的好处:
1.当人们需要供体器官和骨髓移植时,可以对照基因身份证寻找,尤其是我国目前正在建立人类基因库,到时医生可以从基因库中迅速找到组织配型相同的器官、血液或细胞,以最快的速度救助病人;
2.年轻人如果在婚前拥有基因身份证,就如同做了全面的婚前检查,可以避免遗传性疾病的发生;
3.另外在家族性疾病的研究、亲子鉴定、血缘的族谱上的追寻确认上都有重大意义。
如果每个人都有一张基因身份证,犯罪分子将无处可逃,像印度洋海啸期间那样的遗体辨认难度也会大大减轻。
基因身份证的弊端:
1.从现在科技来看,对科技以及金钱要求太高了。
在少数人群实现还可能,但如果大规模推广很明显不实际;
2.而且身份证的制作是要经过很多环节的。
比如,各种采集,然后一级一级的向上面汇报,中途需要经过很多人,如果有一环节泄露,这是很麻烦的。
毕竟基因不像指纹,相片那种比较表面的东西。