指示剂的封闭现象是指某些指示剂能与某些金属离子生成及稳定的络合物，这些络合物比对应的MY络合物更稳定，以致于达到等当点时滴入过量的EDTA，也不能夺取指示剂络合物中的金属离子，指示剂不能释放出来，看不到颜色的变化。
这种现象叫指示剂的封闭现象。
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法，许多物质的测定都采用分光光度法，在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度，如以波长为横坐标，吸收强度为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线，利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。
用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法，用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。
一、化学反应中“sn1反应”与“sn2反应”的区别方法：若反应产物构型全部翻转，即产物单一则是“sn1反应”。
反之若既有构型翻转产物又有不翻转的产物，即产物不唯一则是“sn2反应”。
二、“sn2反应”：“sn2反应”全称为“双分子亲核取代反应反应”是亲核取代反应的一类，其中S代表取代，N代表亲核，2代表反应的决速步涉及两种分子。
三、“sn1反应”：“sn1反应”即“单分子亲核取代反应”，是“亲核取代反应”的一类，其中S代表取代，N代表亲核，1代表反应的决速步涉及一种分子。