色谱测试在当前时期基本是指使用高效液相色谱仪或是气相色谱仪,对待测样品中的某些单一或多组分进行定性或定量检测。
根据样品的物理和化学性质不同,选择合适的使用方式进行检测,易挥发的极性较弱的物质可使用气相色谱仪,其他物质可使用高效液相色谱仪,所以,高效液相色谱仪的使用范围更加宽泛一些,且高效液相色谱仪根据流动相和固定相的极性不同,也还分为正相和反相两种,其中正相色谱的固定相极性大于流动相的极性,对样品的洗脱顺序为极性越强的物质出峰越晚,反相色谱的固定相极性要弱于流动相的极性,对样品的洗脱顺序为极性越强的物质出峰越早。
另,色谱测试中,仪器系统中压力的大小、检测器的类型、延迟体积的大小、色谱柱的类型和填料的规格、流动相的配比等因素,都会影响到色谱分离的效果,从而影响测试的效率。
色谱法又称色谱分析、色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,是利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
色谱法起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科,即色谱学。
色谱分析做系统适用性试验主要是为了确定分析使用的色谱系统是有效的、适用的。
系统适用性通常用四个参数来确定系统的适用性:分离度、柱效、重复性和拖尾因子。
其中分离度和柱效是二个最重要、也更具有实用意义的参数。
分离度是判断两物质在一个方法中分离的程度,虽然与柱效相关,但在衡量系统适用性时,首先强调的应该是分离度,只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时,规定柱效才有其特殊重要性。
重复性和拖尾因子,分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。
重现性保证了方法的可重复性,对柱效能提出了要求,柱子老化、塌陷,拖尾因子则难以达到要求。