影响光合作用最主要的因素是酶的种类和光合色素含量。
叶绿体中含有多种与光合作用有关的酶，但不同的酶作用不同，影响光合作用的速率也不同，例如在光反应阶段和暗反应阶段影响反应的是酶的种类不同，光反应阶段时，光合速率比较快，暗反应阶段时，光合速率较慢。
影响光合反应速率的还有光合色素含量，例如嫩叶叶片组织发育不健全，叶绿体小，片层结构不发达，光和色素含量低，捕光能力弱，光合酶含量与活性低，因此表观光合速率低。
随着幼叶的成长，光合速率不断提高。
当叶片伸展至叶面积最大和厚度最大时，光合作用速率达最大值。
影响光合作用的外界因素有三种：光照强度：光合作用是一个光生物化学反应，所以光合速率随着光照强度的增加而加快，但超过一定范围之后，光合速率的增加变慢，直到不再增加；二氧化碳浓度：二氧化碳是绿色植物光合作用的原料，浓度的高低影响了光合作用暗反应的进行，在一定范围内提高二氧化碳的浓度能提高光合作用的速率，二氧化碳浓度达到一定值之后光合作用速率不再增加，这是因为光反应的产物有限；温度：温度对光合作用的影响较为复杂，由于光合作用包括光反应和暗反应两个部分，光反应主要涉及光物理和光化学反应过程，尤其是与光有直接关系的步骤，不包括酶促反应，因此光反应部分受温度的影响小，甚至不受温度影响；而暗反应是一系列酶促反应，明显地受温度变化影响和制约。
1.二氧化碳的浓度：它影响了光合作用暗反应的进行。
在一定范围内提高二氧化碳的浓度能提高光合作用的速率，其浓度达到一定值之后光合作用速率不再增加，这是因为光反应的产物有限；
2.温度：光合作用的暗反应受温度变化的影响和制约。
当温高于光合作用的最适温度时，光合速率明显地表现出随温度年升而下降。
这是由于高温引起催化暗反应的有关酶钝化、变性，同时高温还会导致叶绿体结构发生变化和受损；高温加剧植物的呼吸作用，而且使二氧化碳溶解度的下降超过氧溶解度的下降，结果利于光呼吸而不利于光合作用；
3.矿质元素：它直接或间接影响光合作用；
4.水分：是光合作用的原料之一，可影响叶片气孔的开闭，间接影响二氧化碳的吸收，缺乏水时会使光合速率下降。